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高效液相色譜儀流動相的選擇原則

[2016/3/21]

        高效液相色譜儀分析中,選擇流動相時應(yīng)考慮流動相與填料的作用、純度、與檢測器的匹配、粘度、對樣品的溶解度和樣品回收等方面。

一、流動相與填料的作用:

        流動相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。

        低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機(jī)相會溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。

        堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。

        酸性流動相不能用于氧化鋁和氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。

二、純度:

        色譜柱的壽命與大量流動相通過有關(guān),特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時。

三、與檢測器的匹配:

        當(dāng)使用UVD時,所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收或吸收很小。

        當(dāng)使用RID時,應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相,以提高靈敏度。

四、粘度:

        高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散和傳質(zhì),使柱效降低,還會使柱壓增加,分離時間延長。最好選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動相。

五、對樣品的溶解度:

        如果溶解度欠佳,樣品會在色譜柱內(nèi)沉淀,不但影響純化分離,而且會使色譜柱惡化。

六、樣品回收:

        應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。